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　　主要儀器與試劑

 

　　液相色譜儀、配四元梯度泵、在線真空脫氣機、自動進樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測器、固相萃取儀、超聲波清洗器、離心機、固相萃取小柱：OASIS MCX，6mL，500mg。三聚氰胺標準品，純度99%。

 

　　樣品處理

 

　　提?。簻蚀_稱取經(jīng)粉碎混勻后樣品5.0g，加入50mL 1%三氯乙酸溶液及2 mL 2%乙酸鉛溶液，混勻后超聲提取30min，高速離心后取上清液待凈化。

 

　　凈化：將固相萃取小柱（6mL，500mg）置于固相萃取儀樣品架上，分別加入5mL甲醇、5mL水活化，再準確移取5.0mL離心液上柱?；罨吧?樣時，將樣品架升至頂部通過調(diào)節(jié)面板旋鈕來調(diào)節(jié)N2氣流小，控制流速不超過1mL/min。然后再用5mL水、5mL甲醇洗滌SPE   柱，棄去洗脫液，將小柱升至頂部調(diào)節(jié)氣閥旋鈕自動加壓吹干小柱，用5%氨水甲醇溶液5mL洗脫，收集洗脫液用氮吹儀吹干，用甲醇-水（2:8,V/V）定 容至1.0mL,過0.45μm濾膜，上機測定。

 

　　樣品提取與凈化

 

　　三氯乙酸具有沉淀乳及其制品中蛋白質(zhì)的作用，而且有助于三聚氰胺的溶解。由于三聚氰胺呈弱堿性。（弱陽離子化合物），采用陽離子交換柱進行凈化可達到去除雜質(zhì)，提高檢測靈敏度、重現(xiàn)性和回收率的效果。

 

　　固相萃取儀的應(yīng)用

 

　　固相萃取儀具有、簡便的特點。它可通過該裝置中的氣流調(diào)節(jié)閥來控制小柱流速的大小，并可直接吹干小柱，保證每小柱在活化洗脫過程中具有良好的重現(xiàn) 性。并且可配套不同規(guī)格的固相萃取小柱（如1mL，3mL，6mL等）使用，一次操作可同時處理48個樣品。我們在奶粉中添加（2.0～50.0）   ug/mL等不同濃度的三聚氰胺，進行加標回收和重現(xiàn)性實驗，回收率在95～99%之間。相對標準偏差均小于3%。

 

　　結(jié)論

 

　　固相萃取儀的加壓操作是通過在固相萃取小柱的上方施加一定壓力空氣或N2來實現(xiàn)。

 

　　這樣可加快過濾速度，控制柱子活化、淋洗、洗脫全過程的流速，使溶液易于進入固定相孔隙，有利于樣液與固定相緊密接觸，從而提高萃取效果。它克服常規(guī) 的手動固相萃取操作費時、不能確保穩(wěn)定的流速、不同人員操作結(jié)果偏差較大的問題，通過簡單的控制消除人為操作的誤差，保證在短時間內(nèi)同時處理幾十個樣品并具有良好的重現(xiàn)性。